1、控制性超排卵
由于自月经周期的长短因人而异,同一患者不同周期也存在差异,所以不易安排取卵时间,而且自然周期中只有一个优势卵泡发育,受精后只能形成一个胚胎,而移植一个胚胎的妊娠率是很低的。所以需要采用控制性超排卵来增强与改善卵巢功能,以达到不受自然周期的限制、获得多个健康卵子的目的,提供多个胚胎移植,并尽可能使黄体发育与子宫内膜功能同步。控制性超排卵一般是先用GnRHa使体内FSH和LH降调,再施与HMG或FSH排卵药物,刺激卵巢中的卵泡成长,依据患者对药物的反应性调整药物使用剂量,患者的年龄及药物的使用剂量不同,所获得的卵子数亦不同。
2、监测卵泡
为评价卵巢刺激效果与决定取卵时间,须利用阴道B超来监测卵泡大小,并配合抽血检查E2值 (雌激素),调整用药量。当二至三个以上的卵泡直径大于1.8cm,且1.4cm以上的卵泡数与E2值相当,便可注射人绒毛促性腺激素(hCG),促使卵泡成熟。在注射hCG后34-36小时取卵。
3、我院无痛取卵
从1999年开始加藤总部独立开发取卵针。目前也是国内最细的取卵针21G, 是世界标准的18-19G取卵针口径的1/2以下。自从采用日本加藤总部独自研发的取卵针后,取卵引起的腹腔内出血病例大大减少,而且不需要麻醉或者仅需局部麻醉。取卵针可以取小至3mm左右的小卵泡。取卵后安静休息30分钟左右就可以离院。
4、取精
精子取出的时间与取卵的日子为同一天。取精前洗净双手,用自慰法留取精液。所给的小杯是无菌的,留取时不要触摸杯缘及杯内。取出的精液采用上游法或Percoll密度梯度离心法处理。
5、体外受精
取卵后4-5小时将处理后的精子与卵子放在同一个培养皿中,共同培养18小时后,可在显微镜下观察受精情况。若精子质量太差,无法自然受精,则必须以显微注射法强迫受精 (参考卵细胞浆内单精子显微授精)。
6、胚胎移植
受精卵在体外培养48-72小时可发育到8-16细胞期胚胎。此时依据患者的年龄、曾经怀孕与否及胚胎的质量,决定移植胚胎的数目,多余的胚胎可冷冻保存。胚胎移植一般不需麻醉。目前多在受精后2-3天移植胚胎,我所采用的是受精后3-5天胚胎移植。推迟胚胎移植的时间,对体外培养的条件要求就越高,但推迟移植时间更符合妊娠生理,同时也可通过自然筛选淘汰劣质胚胎,可提高妊娠率,降低多胎率。
7、胚胎移植后补充激素
目前我们多采用注射法给予黄体酮支持黄体。如果确定妊娠,则改用hCG继续补充到怀孕10周。
胚胎移植后14天,可由验尿或抽血确定是否妊娠。
(匡延平教授)
试管婴儿流程
试管婴儿是指从女性卵巢内取出卵子,在实验室里让它们与男方的精子结合,形成胚胎,然后转移胚胎到子宫内,使之在女性子宫内着床、妊娠的过程。和正常受孕最大的不同就是,试管婴儿是通过人工让精子和卵子结合形成受精卵后再移植入子宫内。试管婴儿流程如下:
1、药物刺激卵巢,控制性排卵;
2、监测卵泡至发育成熟;
3、经阴道超声介导下取卵;
4、取精;
5、体外受精,即将卵母细胞与精子在模拟输卵管环境的培养液中受精;
6、胚胎体外培养,即将受精卵在体外培养2-5日,形成卵裂期或囊胚期胚胎;
7、进行子宫腔内胚胎移植;
8、胚胎移植后补充黄体;
9、胚胎移植后第14天验晨尿或血hCG水平确定是否妊娠;
10、移植后4-5周进行阴道超声检查确定宫内临床妊。